（1）建立微小小球藻高密度异养发酵技术利用改良的Bristol Medium培养基（简称BM培养基，含10 g/L葡萄糖，0.01 g/L FeCl3•6H20，1 ml/L微量元素母液）在温度25℃下培养微小小球藻，测定其生长曲线和生物量产率，结果表明微藻生长在第1天达到对数期，在第6天达到稳定期。同时还通过单因素试验探究了葡萄糖含量、氮源种类及酵母粉含量、初始pH值和NaCL含量对微藻生物量的影响，优化其培养条件。最终得出微小小球藻液体培养最适葡萄糖含量为12.5 g/L、氮源为1.6 g/L酵母粉，最佳初始pH值为7.0，NaCl含量同基础培养基含量相同，即0.025g/L。在单因素实验的基础上，经5 L发酵罐优化并放大培养，微小小球藻异养发酵获得的最高生物量为56 g/L。 （2）建立水酶法提取微小小球藻油脂的工艺通过优化实验最终得出利用水酶法提取微藻油的最适工艺条件为：料液比1:7、中性蛋白酶的添加量7%、酶解温度45 ℃、酶解时间3 h、酶解pH 6.5；碱性蛋白酶的添加量10%、酶解温度68 ℃、酶解时间6 h、酶解pH 9.4。在此条件下微藻油脂的提取率可以达到90.32±0.13%。 （3）建立HSCCC分离纯化EPA技术，获得高纯度EPA样品采用高速逆流色谱技术（HSCCC）分离纯化微小小球藻油中的EPA，经筛选适宜的两相溶剂体系为正庚烷:乙酸乙酯:甲醇:水=15:1:15:1，在此两相溶剂体系中， EPA在上下相中的分配系数K值为0.65，以上相为固定相，下相为流动相，在流速为3 ml/min、转速为913 rpm、分离温度为21℃的条件分离获得的EPA样品，经高效液相色谱检测其纯度均为98.45%。